肿瘤组织是基础医学研究、药物筛选与临床分子检测的核心样品来源。对肿瘤组织进行高效、保质地细化处理，是后续核酸提取、蛋白分析、基因组测序等流程的前置关键步骤。然而肿瘤组织对温度变化极为敏感——研磨过程中产生的机械热易导致RNA降解、蛋白质变性失活，直接影响下游数据的可靠性。

此次实验采用上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪，在可控低温条件下对肿瘤组织进行研磨处理，旨在验证冷冻研磨方案对生物大分子完整性的保护效果，同时获取满足RNA提取所需的样品破碎粒度。

实验仪器与解决方案

实验仪器：上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪

冷冻研磨仪一种快速、高效、可控温的研磨系统。在高频摆动作用下，研磨球在研磨仓内高速撞击及摩擦，短时间内完成样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁，同时制冷模块持续提供低温环境，有效抑制研磨产热对样品的破坏。

冷冻研磨仪助力样品前处理研磨的实验步骤：

1. 称取适量肿瘤组织，分装至若干无酶离心管内，每支离心管投入不锈钢研磨珠，按照实验规范加入定量 Trizol 试剂，逐一编号标记。

2. 开启 CLN 冷冻研磨仪制冷模块，设定预冷温度，将装好样品的离心管整齐装入金属适配器，样品对称排布、配平装载，连同适配器放入研磨仓预冷。

3. 预冷完成后，将适配器卡入 CLN 研磨仪卡槽，锁紧固定螺母，确认制冷模块持续运行。

4. 仪器触屏设置运行参数，参数确认无误后启动设备。

5. 程序全部运行结束，待仪器完全停止振荡后，打开设备取出离心管观察破碎状态。

实验操作注意事项：

1. 离心管内肿瘤组织 + Trizol 总体积不得超过离心管容积 1/3，

2. 金属适配器必须对称均衡摆放样品。

3. Trizol 试剂具有腐蚀性与刺激性，全程佩戴一次性乳胶手套，在通风橱内操作。

肿瘤组织样品前处理研磨前后实验效果对比图：

冷冻研磨仪对肿瘤组织样品前处理研磨的效果图可由上图看出，样品组织细化程度呈现均一状，无残留，RNA/RIN 值7.8（完整性好），组织样品的蛋白活性保留率>90%。

实验结果：

经 CLN 冷冻研磨仪处理后的肿瘤组织样品，肉眼可见组织从完整块状变为均匀乳白色糊状液，无可见组织碎片残留。加入 Trizol 的裂解液呈均一状态，表明细胞已完全破壁、核酸充分释放。

与常温研磨对照组相比，冷冻研磨组提取的RNA完整性指数（RIN值）显著提升，降解片段明显减少，证明 -50°C制冷环境有效抑制了研磨过程中的核酸酶活性与热变性。